线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡便不可逆转。

JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在正常细胞内，线粒体膜电位较高，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可产生红色荧光；凋亡早期，线粒体膜电位降低，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体，可产生绿色荧光。

材料与仪器

器材：培养箱，荧光显微镜，离心机，移液枪，枪头，15 ml 离心管

试剂：含 10％ FBS 的细胞培养基，PBS，线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1），灭菌超纯水

基本实验步骤

1. 配制JC-1 染色工作液：按照试剂盒说明配制相应用量的 JC-1 染色工作液；

2. 设置阳性对照，阳性对照为 CCCP， 按照 10 μM 的终浓度 于37 ℃ 处理细胞 20 分钟；

3. 需检测的细胞去除培养基，PBS 洗涤 1 次；

4. 加入 1 ml JC-1 染色液，于细胞培养箱中孵育 20 分钟；

5. 去除上清，用 JC-1 染色缓冲液洗涤 2 次；

6. 加入 1 ml 细胞培养基，荧光显微镜下观察拍照。

注意事项

1. 工作液配制先把 JC-1（200x）用超纯水充分溶解混匀后，加入 JC-1 染色缓冲液（5x）。不可先配制 JC-1 染色缓冲液（1x）再加入 JC-1（200x），这样 JC-1 会很难充分溶解，会严重影响后续的检测。

2. 装载完 JC-1 后用 JC-1 染色缓冲液（1x）洗涤时，使 JC-1 染色缓冲液（1x）保持 4℃ 左右，此时的洗涤效果较好。 

3. JC-1 探针装载完并洗涤后尽量在 30 分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。

4. 请勿把 JC-1 染色缓冲液（5x）全部配制成 JC-1 染色缓冲液（1x），试剂盒使用过程中需直接使用 JC-1 染色缓冲液（5x）。

5. 不同公司的试剂盒操作步骤略有不同，应严格按照说明书进行操作。

苏州奎克泰生物为韩国NanoEnTek中国区独家总授权，JuLI系列活细胞成像仪深受赞誉。JuLI Br是一款明场的实时活细胞成像分析仪，实时观察/拍摄/记录细胞生长的全周期。镜头与底座分开，由数据线连接进行数据传输和电源提供；镜头可以放置在标准培养箱中，无需将样本拿出培养箱就可实现实时细胞生长状态观察、监测、记录、分析。通过设置拍摄时长和拍摄时间间隔可以通过视频和照片的方式将细胞全生长过程记录下来，避免错过关键时刻，无需全程守在培养箱旁。任何变化都可以通过培养箱外的底座观察到，底座配有触控屏，可以实时查看细胞状态和操作以获得细胞数量、存活率、浓度、融合度、细胞生长曲线等结果。这一款的计数功能是选配。Br的底座还可以同时连接两个镜头，实现对比实验的实时对照。 JuLI FL是一款带荧光（GFP/RFP）的实时活细胞影像分析仪，与JuLI Br外观一样，Br有的功能FL都具备，且计数功能是FL标配，无需选配。除了Br能实现的细胞计数、监测、拍照、形成视频、融合度、生长曲线等功能，FL还可以测定转染效率等级（GFP/RFP表达水平）。FL同样可以实现一个底座同时连接两个镜头，可搭配一个GFP镜头和一个RFP镜头，就能实现双色荧光+明场。 JuLI Stage是一款全自动活细胞荧光监控系统，具有三色荧光。与Br/FL一样可置于培养箱内实时观察/监测/拍摄细胞生长情况、计数细胞、计算细胞融合度、生成动态影像及生长曲线。Stage的载物台是可以移动的，适用6到384孔板、细胞培养皿、细胞培养瓶及各种玻片等培养耗材。能够实现自动扫描、自动对焦和图像拼接功能。Stage还自配4X、10X和20X三个可替换物镜，可以根据实验需要选择合适的物镜倍数。

转载：

http://pro.biomart.cn/lab-web/method/31gnrsggo3jjh.html