材料与仪器

【材料】细胞悬液，化合物溶液、CCK-8 试剂、完全培养基、PBS、0.25% Trypsin-EDTA

【仪器，耗材】96 孔板，二氧化碳培养箱，检测波长 450-490nm酶标仪

步骤

1. 根据具体细胞类型确定其在 96 孔板种植密度，以对照组细胞密度至检测时达到 70%-90% 为参照，每组设置 3-6 个复孔，孔板边缘空不用，加入与培养基等体积的无菌 PBS 溶液；

2. 每孔加入培养基体积 1/10 的CCK-8 溶液。若起始的培养体积为 200 微升，则需加入 20 微升 CCK-8 溶液，其它情况以此类推。同时以加了相同体积细胞培养液和 CCK-8 溶液但没有细胞的孔作为空白对照。若所用药物会干扰检测结果，则选加入等体积细胞培养液、药物和 CCK-8 溶液但无细胞的孔作为空白对照（注意不可产生气泡）；

3. 在细胞培养箱内继续孵育 2-4 小时，建议选取 2、3、4 小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验；

4. 在 450 nm 测定吸光度。如无 450 nm 滤光片，可以使用 420-480 nm 的滤光片。可以使用大于 600 nm 的波长，例如 650 nm，作为参考波长进行双波长测定。

转载：

http://pro.biomart.cn/lab-web/method/316nsasgo4ooh.html