细胞划痕实验
细胞划痕实验是检测细胞活力的常见实验之一。细胞划痕实验常用方法是在人为划线的基础上加显微镜观察，此方法需频繁拿出细胞，那么有什么新方法可以弥补这种不足呢？本文将介绍一种新方法-使用活细胞成像系统，置于培养箱内实时动态成像，监测细胞变化情况。我们分析了新方法对比常用方法的优势，同时列举了几篇活细胞成像分析系统应用在细胞划痕方向的高分文章，文章发表于《Materials & Design》《Science Immunology》等期刊。该方法获得了科研人员的认可，且在细胞划痕实验中被广泛使用，新方法的可靠性得到了证实。
具体操作步骤：
1. 准备细胞，将贴壁细胞用胰酶消化下来，制备成细胞悬液。
2. 细胞计数后，进行铺板。每孔加入合适细胞，等待细胞长满整个孔板。
3. 选择10μL或者200μL的枪头，借助直尺进行划线，产生细胞划痕。
4. 用PBS轻轻洗去细胞碎片，加入无血清培养基或者低血清培养基，放入培养箱之前拍照记录。
5. 拍照观察，每隔一定时间对样本进行拍照记录，计算细胞的迁移率。
划痕实验操作注意事项：
1. 开展划痕实验，原则上细胞要铺满整个孔板底部再进行划线，否则会影响后续实验结果分析
2. 同种细胞划线最好使用同一个枪头，减小划痕宽度的误差（人工划线难免产生误差，可借助设备进行划线）。
3. PBS冲洗时动作轻柔，避免将其他贴壁细胞洗去。反复清洗，将细胞碎片去除。
4. 选用无血清培养基或者低血清培养基对细胞进行培养。为减少细胞增殖对迁移的影响，可加入丝裂霉素处理细胞，抑制细胞的分裂。
上述实验步骤为常规实验室操作，不足之处在于：对细胞迁移进行计算，要频繁拿取细胞样本在显微镜下观察，拍照记录结果。操作繁琐，耗时费力，实验成功率不能保证，最终影响实验效率。
那么有什么新工具可以弥补这些不足，助力于细胞划痕实验呢？
奎克泰生物的JuLI™系列实时活细胞成像系统能够放置于培养箱内，实时观察、拍摄记录细胞变化的全过程，实现细胞计数、监测、拍照、形成视频、融合度、等功能。此外，JuLI™ Stage可选配划痕设备，为96孔板生成统一的划痕，利用配套的划痕软件实时分析划痕。
需频繁拿出培养箱，影响细胞生长环境
常规方法
可长期放置于培养箱， 保证细胞稳定生长环境，
操作简单，省时省力
新方法-活细胞成像系统
以下来自世界各地权威机构发表的文章中，均为使用JuLI™系列活细胞成像系统做的细胞划痕实验：
1. 来自韩国科学技术大学机械工程系的研究团队在《Materials & Design》期刊发表题为“Long-term study on off-the-shelf tracheal graft: A conceptual approach for urgent implantation”的文章，研究人员在hTMSCs细胞单层上直接划伤，使用JuLI™ Br观察细胞向创面的迁移情况。监测总时长24h，每隔4h拍摄一次图像。
2. 来自韩国加川医科大学解剖学系的研究团队在《Experimental & Molecular Medicine》期刊发表题为“Proangiogenic functions of an RGD-SLAY-containing osteopontin icosamer peptide in HUVECs and in the postischemic brain”的文章，研究人员在HUVECs细胞上制造划痕，用不同药物处理细胞，使用JuLI™ Stage进行拍摄，最终呈现第0 h和第12 h的拍摄结果。
3. 来自英国帝国理工学院心肺研究所的研究团队在《Science Immunology》期刊发表题为“Itaconate controls the severity of pulmonary fibrosis”的文章，研究人员在用衣康酸盐或不用衣康酸盐处理的情况下，使用JuLI™ Stage拍摄60h，监测HLF细胞的伤口愈合能力。数据结果显示暴露于衣康酸盐后，HLF细胞的伤口愈合能力显著降低。
参考文献
[1]
[2]
Experimental and Molecular Medicine,2018,50(S10). (IF12.8)
[3]
