细胞周期的检测分析，是利用核酸染料可以与 DNA 分子特异性结合的特性，用流式细胞仪分析细胞周期各个阶段的 DNA 分布状态，从而计算出各个期的百分含量。

原理

细胞周期的检测分析的基本过程可分为如下几步：

1. 收集待检测细胞，用 2 ml PBS 重悬，1000 r/min 离心 5 min，弃上清。细胞数要求每组 1 X 106 个细胞。

2. 加入 1 ml PBS 和 2 ml 无水乙醇，重悬，用封口膜封口。4 °C 下可保存 1 h 至 15 d。

3. 将待检测样品 1000 r/min 离心 5 min，弃固定液，再用 2 ml PBS，1000 r/min 离心 5 min，洗涤 2 次。弃上清，用 400 μl PBS 重悬细胞。

4. 加入 50 μl 的 PI 和 50 μl 的 RNase，室温避光孵育 30 min。

5. 上流式细胞仪检测。

材料

流式细胞仪、离心机

试剂

① PI 400 μg/ml，PI 溶于水，4 ℃ 避光保存；

② RNase 试剂。配制成 1 mg/ml，RNase 溶于 PBS，分装，-20 ℃ 保存

③ 无水乙醇、PBS

操作

细胞周期的检测分析的基本过程可分为如下几步：

1. 收集待检测细胞，用 2 ml PBS 重悬，1000 r/min 离心 5 min，弃上清。细胞数要求每组 1 X 106 个细胞。

2. 加入 1 ml PBS 和 2 ml 无水乙醇，重悬，用封口膜封口。4 °C 下可保存 1 h 至 15 d。

3. 将待检测样品 1000 r/min 离心 5 min，弃固定液，再用 2 ml PBS，1000 r/min 离心 5 min，洗涤 2 次。弃上清，用 400 μl PBS 重悬细胞。

4. 加入 50 μl 的 PI 和 50 μl 的 RNase，室温避光孵育 30 min。

5. 上流式细胞仪检测。

奎克泰生物代理NanoEnTek的ADAMII™ LS图像型荧光细胞分析仪，是一款基于4通道(明场，GFP,RFP和DAPI)的图像型荧光细胞分析仪，适用于生命科学实验室。用户可通过它实现细胞的各种分析，包括细胞计数(总数和细胞核)、存活率、荧光表达、细胞凋亡、细胞生长周期，与流式细胞仪类似。

转载：

http://pro.biomart.cn/lab-web/method/31itaqcgo5qbi.html