间充质到上皮转化 (MET) 参与输卵管和子宫上皮的维持、修复和致癌,并且也在胚胎发育过程中起着至关重要的作用。然而,在这些器官中间充质细胞转化为上皮细胞的确凿证据少之又少。尽管成人器官中MET的证据有限,但有报道称MET可能发生在FRT中。作者通过在胚胎和成体阶段诱导这些细胞中的永久报告基因表达(由女性生殖道间充质细胞标记基因(AMHR2,CSPG4和PDGFRβ),对上皮细胞和间充质细胞进行谱系示踪,最终发现并没有明确的证据证明MET存在于成人的输卵管和子宫的上皮中。
研究采用成体和胚胎谱系追踪、多西环素诱导GFP的表达、他莫昔芬治疗、RNA原位杂交、X-gal/β-半乳糖苷酶染色、免疫荧光、免疫组化、核法染色等实验方法,证明间充质细胞并不会分化为上皮细胞。
一项研究报道了基质细胞在体外可以转化为上皮细胞,因此作者将从成年小鼠(PdgfrβrtTa;tetOH2BJGFP)中分离的输卵管基质细胞与上皮细胞在强西环素存在的条件下共培养。使用JuLI™ Stage活细胞成像分析系统延时拍摄21天,每隔3天拍摄一次GFP荧光图像与明场图像。图为体外共培养的输卵管上皮细胞和基质细胞的代表性明场与荧光图像。结果显示共培养21天的的输卵管上皮类器官中并无任何的GFP表达,但是在间质细胞中却存在着明显的核GFP表达。
使用JuLI™ Stage在明场与GFP通道下延时记录21天的输卵管上皮细胞发育为类器官的图像。