材料与设备:
1. 一次性瓶或玻璃器皿,微量离心机
2. PI染色液,冷PBS,Annexin V-FITC,1X Binding Buffer
3. 细胞
步骤:
1. 离心收集悬浮细胞,微量离心机转速2000RPM,离心时间5min,弃培养基;
2. 用冷PBS洗涤细胞两次;
3. 用400ul 1X Binding Buffer悬浮细胞,浓度大约为1 X 10 cells/ml;
4. 在细胞悬浮液中加入 5ul Annexin V-FITC,轻轻混匀后于2-8°C避光条件下孵育 15 分钟;
5. 加入10ul PI 后轻轻混匀于 2-8°C 避光条件下孵育 5 分钟;
6. 使用细胞成像仪检测。
苏州奎克泰生物为韩国NanoEnTek中国区独家总授权,JuLI系列活细胞成像仪深受赞誉。JuLI Stage是一款全自动活细胞荧光监控系统,具有三色荧光。与Br/FL一样可置于培养箱内实时观察/监测/拍摄细胞生长情况、计数细胞、计算细胞融合度、生成动态影像及生长曲线。Stage的载物台是可以移动的,适用6到384孔板、细胞培养皿、细胞培养瓶及各种玻片等培养耗材。能够实现自动扫描、自动对焦和图像拼接功能。Stage还自配4X、10X和24X三个可替换物镜,可以根据实验需要选择合适的物镜倍数。
转载:
http://pro.biomart.cn/lab-web/method/316nsasgo4ou5.html