细胞侵袭实验是基础的细胞医学实验之一,旨在评估细胞迁移和侵袭能力。
细胞侵袭是转移级联反应的第一步,即细胞获得移动的能力,穿透周围组织,进入淋巴和血管进行扩散。细胞侵袭是细胞迁移的一种,是正常细胞和癌细胞对化学和机械刺激做出的正常反应。细胞侵袭实验模拟细胞在体内生理环境下的行为并对其进行观察,在伤口修复、血管形成、炎症反应以及组织异常浸润、肿瘤细胞转移等过程中较为常见,研究细胞侵袭机制对于生理、病理等过程意义重大,而肿瘤细胞的侵袭是肿瘤相关信号通路、药物治疗、靶向治疗、致癌/抑癌基因等肿瘤学研究的一个关键指标。
目前,研究细胞侵袭的常用实验方法是Transwell法。Transwell法成本较高,但能模拟细胞在3D空间的移动,为细胞提供一个更贴近真实体内的环境。
简单来说,将transwell小室放在培养孔板中,小室内称为上室,小室放入的培养孔板称为下室。上室底部有一层聚碳酸酯膜,该膜具有通透性,能够将上室培养液和下室培养液分隔开来,下室中的培养液可以影响上室中的细胞,从而研究下室中液体对细胞的生长、迁移的影响。将细胞接种到含有低营养的上层培养液中,下室中含有高营养的培养基,细胞为了获取更多营养会向下室移动,最后检测下室中的细胞量可以判断细胞侵袭能力的强弱。
2020年,韩国科学技术院和韩国标准科学研究院在《Scientific Reports》期刊中联合发表一篇名为“Novel invasion indices quantify the feed-forward facilitation of tumor invasion by macrophages”的文章【新的侵袭指数量化了巨噬细胞对肿瘤侵袭的前馈促进作用】,文章中开发了一种基于图像分析的方法来量化HT1080人纤维肉瘤肿瘤细胞球体的侵袭性,进一步用该分析方法验证了LLC1小鼠肺癌细胞和RAW264.7小鼠巨噬细胞之间的相互作用。我们发现RAW264.7细胞条件培养基增加了肿瘤球体的侵袭,同时降低了肿瘤细胞的增殖。
实验人员使用JuLI™ Br观察LLC1球形侵袭试验,连续拍摄四天记录不同浓度的RCM处理球体侵袭变化。
参考文献:
[1] J G L,Suk-Jo K,Youn J L. Novel invasion indices quantify the feed-forward facilitation of tumor invasion by macrophages.[J]. Scientific reports,2020,10(1).
https://blog.csdn.net/zea408497299/article/details/125444443