摘要

微绒毛包含症（MVID）是一种由MYO5B基因失活突变引起的罕见先天性疾病，导致新生儿持续的腹泻。尽管已知MYO5B缺失会影响小肠顶端转运蛋白的定位，但引起腹泻的具体机制仍不清楚。本研究旨在探讨MYO5B基因的缺失是否会导致小肠上皮细胞顶端转运蛋白的异常表达，从而揭示MVID引起腹泻的潜在机制。

方法

该研究使用了MYO5B基因敲除小鼠、肠道特异性Myo5b敲除小鼠模型以及患者肠道活检样本。通过免疫荧光、免疫电镜和Ussing腔室实验分析了小鼠肠道组织和肠上皮细胞中的顶端转运蛋白的分布和功能。

主要发现

1. 顶端转运蛋白定位变化：MYO5B缺失的小鼠在顶端未能正常定位钠-氢交换器3（NHE3）、钠-葡萄糖转运蛋白1（SGLT1）和水通道蛋白7（AQP7）。相反，NHE3和SGLT1在细胞内形成了包含物，而CFTR仍保持在顶端膜位置。

2. CFTR依赖的Cl⁻分泌：CFTR活性在MYO5B缺失小鼠中得到维持，且导致肠腔内氯离子浓度增加，这可能加剧了水分流失，从而导致分泌性腹泻。

3. 人类MVID患者的相似性：MVID患者的肠活检显示与小鼠模型类似的转运蛋白错误定位和CFTR的顶端膜表达。

结论

研究表明，MYO5B缺失会影响NHE3、SGLT1和AQP7的顶端定位，导致水分吸收受损，而CFTR依赖的Cl⁻分泌持续存在，加剧水分流失。因此，治疗MVID引起的腹泻可能需要同时恢复Na⁺吸收功能并抑制Cl⁻分泌。这为MVID的潜在治疗提供了新思路。

本文中研究人员使用JuLI™ Stage活细胞成像分析系统进行活细胞延时成像。

(A) H&E 和明视野显微照片显示对照组和 MYO5B KO 衍生肠管的结构相似。

（A) H&E 染色和明视野显微照片显示，经 4-OHT 诱导 MYO5B 缺失和 ETOH 处理的VilCreERT2;MYO5Bflox/flox 小鼠肠管形态相似。

(B) 施用 5 mM 福斯克林会导致经 ETOH 和 4-OHT 处理的 VilCreERT2;MYO5Bflox/flox 衍生肠管膨胀。