今年9月初Cell 期刊发表一篇关于血管内皮细胞的综述：“A systems view of the vascular endothelium in health and disease”。内皮细胞作为单细胞层存在于所有器官中，通常被认为是一个相当惰性的细胞群，但血管内皮细胞作为整体应被视为一个高度动态的系统性分布器官。在此基础上，综述文章系统地总结了血管内皮细胞的各种功能，并提出未来的血管研究方向和新兴的转化观点。

图1 内皮细胞的关键特征

其中，内皮细胞在血管响应和传递中的作用包括细胞迁移（Cell trafficking）。内皮细胞是血液循环和不同器官间的关键界面，在协调细胞进出循环系统的迁移中起着关键作用，通过粘附分子、趋化因子和信号通路的复杂相互作用，内皮细胞调节生理稳态细胞运输以及免疫细胞的刺激募集。

2023年Cell Death Discovery 期刊发表一篇涉及内皮细胞迁移相关的文章。

研究背景：

传统说法认为嵌合RNA是癌症所特有的，是染色体重排的产物，目前这一说法正在受到挑战。先前研究发现，绝大多数嵌合RNA具有组织特异性，大约10%的RNA在多个样品中检测到，其中51个在超过5个不同的样品中检测到。在这些复发性嵌合体中，CTNNBIP1-CLSTN1 存在于大量组织中，并且似乎对于培养物中永生化星形胶质细胞系的生长是必不可少的。此外，研究人员还证明CTNNBIP1-CLSTN1 是一种 cis-SAGe嵌合RNA，当转录因子 CTCF 沉默时被诱导。然而嵌合 RNA 的确切作用及其功能机制尚不清楚。

目的：

本文主要研究CTNNBIP1-CLSTN1在非癌细胞中的表达及其功能机制。具体目标包括：

1.  确定CTNNBIP1-CLSTN1是否是“管家”嵌合RNA的一部分；

2.  探讨其在细胞增殖、迁移及凋亡中的作用；

3.  分析该嵌合RNA如何通过下游通路（如SERPINE2）调控细胞增殖。

方法：

首先证实了这种嵌合RNA存在于不同类型的组织和细胞中，然后从中选择了三种不同的细胞系（HEK-293T 细胞、HUVEC内皮细胞、LO2 细胞）来研究嵌合体与细胞增殖、迁移和凋亡有关的作用，进一步进行转录组测序和下游分析以揭示其功能机制。

结果：

CTNNBIP1-CLSTN1广泛表达于人类组织和细胞类型中。经鉴定CTNNBIP1-CLSTN1 是嵌合 RNA 之一，通过测序、PCR等方法发现其在肝脏、肺、肾脏等处都检测到。

图2 CTNNBIP1-CLSTN1 在各种人体组织和细胞系中的表达

沉默 CTNNBIP1-CLSTN1 降低了细胞增殖和细胞迁移能力。通过CCK8 检测，siCTNNBIP1-CLSTN1 和 siCTNNBIP1 均显著降低细胞增殖。通过JuLI™ Stage活细胞成像分析系统，对细胞迁移能力进行延时记录，每2小时记录一次，共记录24小时。拍摄完成后使用仪器标配的STAT自动分析软件批量处理数据，量化结果。与阴性对照相比，siCTNNBIP1-CLSTN1 和 siCTNNBIP1 均显著抑制细胞迁移。

图3 敲低 CTNNBIP1-CLSTN1 导致 HEK-293T 细胞、HUVEC 和 LO2 细胞的细胞增殖和细胞运动显着降低

沉默 CTNNBIP1-CLSTN1 导致细胞周期停滞和细胞凋亡。通过流式细胞术，与对照组相比，在非癌细胞中，沉默CTNNBIP1-CLSTN1后，细胞增殖明显下降，并导致细胞G2/M期阻滞及凋亡。

图4敲低 CTNNBIP1-CLSTN1 导致 G2/M 期阻滞和细胞凋亡

CTNNBIP1-CLSTN1 通过调节自分泌信号因子SERPINE2影响细胞增殖。通过转录组测序分析，CTNNBIP1-CLSTN1 会通过纤连蛋白1（FN1）和丝氨酸蛋白酶抑制剂E2（SERPINE2）调节细胞增殖，但嵌合 RNA 对细胞增殖的影响主要是由 SERPINE2 所介导。

图5 CTNNBIP1-CLSTN1 通过 SERPINE2 调节细胞增殖

总结：

CTNNBIP1-CLSTN1是新型嵌合RNA的一例，在正常细胞和癌细胞中普遍表达。此外，该嵌合RNA通过SERPINE2通路对细胞增殖的影响为其功能提供了机制基础，表明此类嵌合RNA在正常生理中也具有重要作用。它可以代表一类新型的管家嵌合 RNA来调节各种细胞类型的增殖、划痕、凋亡等活动。