贴壁细胞样本的制备,是免疫染色步骤之一。
原理
贴壁细胞样本的制备的基本原理是使细胞生长在合适的固相支持物玻片上。
材料与仪器
器材:细胞培养箱、玻片、细胞培养板、金属镊子。
试剂:
①细胞培养液 ;
②胰酶 ;
步骤
贴壁细胞样本的制备的基本过程可分为如下几步:
1. 无菌条件下,将无菌处理的玻片放于适当的培养皿或培养板的孔中,盖玻片可以用金属镊子夹取,或者用无菌的吸管吸取。
2. 将悬浮的细胞放入上述组织培养皿中,培养 24 小时,让细胞黏附在玻片上。细胞密度以占据培养孔 30% 左右为宜,细胞过密或重叠将影响测定结果。
3. 如果细胞数目有限,可把细胞悬液直接滴在玻片上,静置 4 小时后再轻轻加入培养液,继续培养约 24 小时。
4. 经过上述处理后,细胞可进行固定。
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